O Pré-Condicionamento com Dexmedetomidina Atenua a Lesão de Isquemia/Reperfusão Miocárdica em Ratos, Suprimindo a Mitofagia Via Ativação do Receptor Α2-Adrenérgico / Dexmedetomidine Preconditioning Attenuates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Rats by Suppressing Mitophagy Via Activating Α2-Adrenergic Receptor

Resumo Fundamento A dexmedetomidina (DEX), um agonista específico do receptor α2-adrenérgico, é protetora contra lesão de isquemia/reperfusão miocárdica (I/R). No entanto, a associação entre a cardioproteção induzida pelo pré-condicionamento DEX e a supressão da mitofagia permanece pouco clara. Objetivo Portanto, nosso objetivo foi investigar se o pré-condicionamento com DEX alivia a I/R, suprimindo a mitofagia via ativação do receptor α2-adrenérgico. Método Sessenta corações de ratos isolados foram tratados com ou sem DEX antes de induzir isquemia e reperfusão; um antagonista do receptor α2-adrenérgico, a ioimbina (YOH), também foi administrado antes da isquemia, isoladamente ou com DEX. A frequência cardíaca (FC), pressão diastólica do ventrículo esquerdo (PDVE), pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE), taxa máxima e mínima de desenvolvimento da pressão ventricular esquerda (±dp/dtmax) e tamanho do infarto do miocárdio foram medidos. A ultraestrutura mitocondrial e as autofagossomas foram avaliadas por microscopia eletrônica de transmissão. O potencial de membrana mitocondrial e os níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) foram medidos usando os ensaios JC-1 e diacetato de diclorodi hidrofluoresceína, respectivamente. Os níveis de expressão das proteínas associadas à mitofagia Beclin1, relação LC3II/I, p62, PINK1 e Parkin foram detectados por western blotting. Resultados Em comparação com o grupo controle, no grupo isquemia/reperfusão, a FC, PDVE e ±dp/dtmax foram notavelmente diminuídas (p<0,05), enquanto os tamanhos da PDFVE e do infarto aumentaram significativamente (p<0,05). O pré-condicionamento com DEX melhorou significativamente a disfunção cardíaca, reduziu o tamanho do infarto do miocárdio, manteve a integridade estrutural mitocondrial, aumentou o potencial de membrana mitocondrial, inibiu a formação de autofagossomas e diminuiu a produção de ROS e a relação Beclin1, relação LC3II/I, expressão PINK1, Parkin e p62(p<0,05). Quando DEX e YOH foram combinados, o YOH cancelou o efeito da DEX, enquanto o uso de YOH sozinha não teve efeito. Conclusão Portanto, o pré-condicionamento DEX foi cardioprotetor contra I/R em ratos, suprimindo a mitofagia por meio da ativação do receptor α2-adrenérgico.

Abstract Background Dexmedetomidine (DEX), a specific α2-adrenergic receptor agonist, is protective against myocardial ischemia/reperfusion injury (MIRI). However, the association between DEX preconditioning-induced cardioprotection and mitophagy suppression remains unclear. Objective Hence, we aimed to investigate whether DEX preconditioning alleviates MIRI by suppressing mitophagy via α2-adrenergic receptor activation. Method Sixty isolated rat hearts were treated with or without DEX before inducing ischemia and reperfusion; an α2-adrenergic receptor antagonist, yohimbine (YOH), was also administered before ischemia, alone or with DEX. The heart rate (HR), left ventricular diastolic pressure (LVDP), left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP), maximal and minimal rate of left ventricular pressure development (±dp/dtmax), and myocardial infarction size were measured. The mitochondrial ultrastructure and autophagosomes were assessed using transmission electron microscopy. Mitochondrial membrane potential and reactive oxygen species (ROS) levels were measured using JC-1 and dichloride hydrofluorescein diacetate assays, respectively. The expression levels of the mitophagy-associated proteins Beclin1, LC3II/I ratio, p62, PINK1, and Parkin were detected by western blotting. Results Compared with the control group, in the ischemia/reperfusion group, the HR, LVDP, and ±dp/dtmax were remarkably decreased (p< 0.05), whereas LVEDP and infarct sizes were significantly increased (p< 0.05). DEX preconditioning significantly improved cardiac dysfunction reduced myocardial infarction size, maintained mitochondrial structural integrity, increased mitochondrial membrane potential, inhibited autophagosomes formation, and decreased ROS production and Beclin1, LC3II/I ratio, PINK1, Parkin, and p62 expression(p< 0.05). When DEX and YOH were combined, YOH canceled the effect of DEX, whereas the use of YOH alone had no effect. Conclusion Therefore, DEX preconditioning was cardioprotective against MIRI in rats by suppressing mitophagy via α2-adrenergic receptor activation.

Renal transplant patients with preformed anti-HLA antibodies: early biopsy findings and clinical outcomes / Pacientes transplantados renais com anticorpos anti-HLA pré-formados: achados precoces de biópsia e desfechos clínicos

Abstract Introduction: Renal fibrosis is the end point of a process that begins at transplant, with ischemia reperfusion and early inflammation, and progresses over time with immunological and non-immunological phenomena. Early identification of morphological markers and intervention could improve graft function and survival. Objective: to evaluate the correlation between intensity and specificity of pre-transplant anti-HLA antibodies and kidney allograft pathology in order to identify early risk factors or markers of allograft dysfunction. Methods: A retrospective cohort of kidney transplant recipients with pre-transplant anti-HLA antibodies who underwent graft biopsy within the first two years post-transplant was divided into two groups according to the specificity of anti-HLA antibodies: nonspecific (non-DSA, n = 29) and specific (DSA+, n = 16). Kidney graft pathology, renal function, and proteinuria were analyzed. Results: general characteristics were similar in both groups, except for the higher dose of thymoglobulin in DSA+ group (p < 0.05). The non-DSA group had higher scores for glomerulosclerosis, interstitial inflammation (i) and interstitial fibrosis (ci) (p < 0.05) and higher incidence of cell-mediated acute rejection. No statistical difference in incidence of antibody-mediated rejection, renal function, and proteinuria was observed during follow up. Discussion and conclusions: the difference in inflammation scores and interstitial fibrosis may be associated to the higher incidence of acute cell-mediated rejection and polyomavirus nephropathy in the Non-DSA group. We also should take into account the protective effect of higher doses of thymoglobulin, reducing ischemia reperfusion injury in the DSA+ group. The short follow-up might have been insufficient to detect long-term changes in allograft tissue, renal function, and proteinuria.

Resumo Introdução: A fibrose renal é o desfecho de um processo iniciado no transplante, com reperfusão, isquemia e inflamação precoce, que progride ao longo do tempo com fenômenos imunológicos e não imunológicos. A identificação de marcadores morfológicos e a intervenção precoce poderiam melhorar a função e a sobrevida do enxerto. Objetivo: Avaliar a correlação entre intensidade e especificidade de anticorpos anti-HLA pré-transplante alterações histológicas do enxerto renal, de forma a identificar fatores de risco ou marcadores de disfunção precoces do aloenxerto. Métodos: O presente estudo incluiu uma coorte retrospectiva de receptores de transplante renal sensibilizados com anticorpos anti-HLA no pré-transplante submetidos a biópsia de enxerto nos primeiros dois anos após o transplante. Os grupos foram divididos em função da especificidade dos anticorpos anti-HLA: sem anticorpos doador-específicos (não-DSA, n = 29) e com anticorpos doador-específicos (DSA+, n = 16). Alterações histológicas do enxerto renal, função renal e proteinúria foram analisados. Resultados: Os dois grupos tinham características gerais semelhantes, exceto pela dose mais elevada de timoglobulina administrada nos indivíduos do grupo DSA+ (p < 0,05). O grupo não-DSA teve escores mais elevados de glomeruloesclerose, inflamação intersticial (i) e fibrose intersticial (ci) (p < 0,05), além de maior incidência de rejeição celular aguda (RCA). Não foi observada diferença estatística na incidência de rejeição mediada por anticorpos, função renal ou proteinúria durante o seguimento. Discussão e Conclusões: A diferença nos escores de inflamação e fibrose intersticial pode estar associada à maior incidência de RCA e nefropatia por poliomavírus no grupo não-DSA. Devemos considerar ainda o efeito protetor das doses mais elevadas de timoglobulina na redução da lesão por isquemia-reperfusão no grupo DSA+. O curto período de seguimento pode ter sido insuficiente para detectar alterações de longo prazo no tecido do aloenxerto, função renal e proteinúria.

The role of adiponectin in ischemia-reperfusion syndrome: a literature review / O papel da adiponectina na síndrome de isquemia e reperfusão: revisão de literatura

ABSTRACT Adiponectin, among other diverse adipokines, is produced in greater quantity and has an effect on the adipose tissue and other tissues in the body. Adiponectin plays three main roles: regulatory metabolic and sensitizing function of insulin in the liver and muscles; it acts as an anti-inflammatory cytokine and in vascular protection, besides important cardiac protection in the presence of ischemia-reperfusion syndrome. Since many situations resulting from traumatic accidents or pathologies are due to cell damage caused by ischemia-reperfusion syndrome, it is relevant to study new therapeutic alternatives that will contribute to reducing these lesions. The objective of this study is to carry out a literature review on the role of adiponectin in ischemia-reperfusion syndrome.

RESUMO A adiponectina, em meio a outras diversas adipocinas, é a produzida em maior quantidade e exerce efeitos no próprio tecido adiposo e em outros diversos tecidos do organismo. Dentre suas funções, a adiponectina apresenta três principais papéis: função metabólica regulatória e sensibilizadora da insulina no fígado e nos músculos atua como citocina anti-inflamatória e vasculoprotetora, além de exercer importante fator cardioprotetor na presença da síndrome de isquemia e reperfusão. Visto que inúmeras situações decorrentes de acidentes traumáticos ou patologias recaem no dano celular causado pela síndrome de isquemia e reperfusão, observa-se a importância de estudar novas alternativas terapêuticas que venham a contribuir para a diminuição dessas lesões. O objetivo do presente estudo é realizar uma revisão de literatura sobre o papel da adiponectina na síndrome de isquemia e reperfusão.

Investigation of the protective effect of enoxaparin and ticagrelor pretreatment against ischemia-reperfusion injury in rat lung tissue

SUMMARY OBJECTIVES This study was conducted to reveal the possible protective effects of ticagrelor and enoxaparin pretreatment against ischemia-reperfusion (IR)-induced injury on the lung tissue of a rat model. METHODS Wistar albino rats were randomly divided into 4 groups as follows: group-1 (control-sham), group-2 (control-saline+IR), group-3 (ticagrelor+IR), group-4 (enoxaparin+IR). Before the ischemic period, saline, ticagrelor, and enoxaparin were administered to the 2nd-4th groups, respectively. In these groups, IR injury was induced by clamping the aorta infrarenally for 2 h, followed by 4 h of reperfusion except group-1. After the rats were euthanized, the lungs were processed for histological examinations. Paraffin sections were stained with Haematoxylin&Eosin (H&E) for light microscopic observation. Apoptosis was evaluated by caspase-3 immunoreactivity. Data were statistically analyzed using the SPSS software. RESULTS In the lung sections stained with H&E, a normal histological structure was observed in group-1, whereas disorganized epithelial cells, hemorrhage, and inflammatory cell infiltration were seen in the alveolar wall in group-2. The histologic structure of the treatment groups was better than that of group-2. Caspase-3(+) apoptotic cells were noticeable in sections of group-2 and were lower in the treatment groups. In group-4, caspase-3 immunostaining was lower than in group-3. In group-2, apoptotic cells were significantly higher than in the other groups (p<0.001). CONCLUSION Based on the histological results, we suggested that both therapies ameliorated the detrimental effects of IR. Caspase-3 immunohistochemistry results also revealed that pre-treatment with enoxaparin gave better results in an IR-induced rat injury model. In further studies, other parameters such as ROS and inflammatory gene expressions should be evaluated for accurate results.

RESUMO OBJETIVOS Este estudo foi realizado para revelar os possíveis efeitos protetores do ticagrelor e do pré-tratamento da enoxaparina no tecido pulmonar contra o modelo de lesão induzida por isquemia-reperfusão (IR). MÉTODOS Ratos albinos Wistar foram randomizados e divididos em quatro grupos: grupo 1 (controle-sham), grupo 2 (controle-salina + IR), grupo 3 (ticagrelor + IR), grupo 4 (enoxaparina + IR). Antes do período isquêmico, salina, ticagrelor e enoxaparina foram administrados nos grupos 2-4, respectivamente. Nesses grupos, a lesão de IR foi induzida pelo clampeamento da aorta na região da infrarrenal por duas horas, seguida por quatro horas de reperfusão, exceto no grupo 1. Após a sacrificação, os pulmões foram processados para exames histológicos. Secções de parafina foram coradas com hematoxilina e eosina (H&E) para observação microscópica de luz. A apoptose foi avaliada pela imunorreatividade da caspase-3. Os dados foram analisados estatisticamente pelo programa SPSS. RESULTADOS Nas secções pulmonares coradas com H&E, estrutura histológica normal foi observada no grupo 1, enquanto células epiteliais desorganizadas, hemorragia e infiltração de células inflamatórias foram observadas na parede alveolar no grupo 2. A estrutura histológica dos grupos de tratamento foi melhor que o grupo 2. Células apoptóticas caspase-3 (+) foram notadas em secções do grupo 2, e essas células foram mais baixas nos grupos de tratamento. No grupo 4, a imunocoloração com caspase-3 foi menor que no grupo 3. No grupo 2, as células apoptóticas foram significativamente maiores que nos outros grupos (p<0,001). CONCLUSÃO Com base nos resultados histológicos, sugerimos que ambas as terapias atenuaram os efeitos prejudiciais da RI. Resultados de imuno-histoquímica com caspase-3 também revelaram que o pré-tratamento com enoxaparina proporcionou melhores resultados no modelo de lesão induzida por IR. Em estudos posteriores, outros parâmetros, como ROS e expressões gênicas inflamatórias, devem ser avaliados quanto a resultados precisos.

Angioplastia primaria en el infarto agudo de miocardio: ¿es beneficioso el condicionamiento isquémico remoto?

El paradigma de la reapertura precoz de la arteria ocluida ha representado un hito en el tratamiento del infarto agudo de miocardio y su aplicación universal en la práctica cardiológica se tradujo en una reducción significativa de la magnitud del daño miocárdico y de la mortalidad por esta causa. Sin embargo, la oclusión coronaria aguda continúa siendo una causa prevalente de muerte y discapacidad de origen cardíaco, por lo cual persiste la búsqueda de nuevos procedimientos, fármacos o estrategias que contribuyan a una mayor preservación del tejido miocárdico en este contexto. El precondicionamiento isquémico cardíaco, en sus diferentes modalidades, a pesar de haber sido objeto de diversos estudios tanto a nivel clínico como experimental, no forma parte de la práctica habitual en los laboratorios de cateterismo cardíaco, servicios de cardiología crítica o unidades de emergencia móvil donde se lleva a cabo la reperfusión miocárdica. En esta controversia, los autores presentan argumentos a favor y en contra de la utilización del precondicionamiento isquémico remoto como adjunto a la angioplastia primaria en un escenario clínico concreto, brindando al lector el estado de la evidencia sobre un procedimiento cuyo margen de utilidad aguarda aún una clara definición.

Summary: Early reopening of the occluded artery paradigm has represented a milestone in the treatment of acute myocardial infarction, and its universal application in cardiological practice lead to a significant reduction in the extension of myocardial injury and mortality from this cause. However, acute coronary occlusion is still a prevalent cause of death and disability; therefore, a lively interest in identificating new procedures, drugs or strategies that contribute to a greater preservation of myocardial tissue persists in this context. Cardiac ischemic preconditioning in its various forms, despite having been object of several studies, both at clinical and experimental levels, is not part of the usual practice of catheterization laboratories, critical cardiology services or mobile emergency units, where myocardial reperfusion is carried out. In this controversy, the authors present arguments for and against the use of remote cardiac ischemic preconditioning as an adjunct to primary angioplasty in a particular clinical stage, providing the reader the status of evidence about a procedure whose profit margin still awaits a clear definition.

O paradigma da reabertura precoce da artéria ocluída representou um marco histórico no tratamento do infarto agudo do miocárdio, e sua aplicação universal na prática cardiológica resultou em uma redução significativa da extensão da lesão miocárdica e da mortalidade por essa causa. No entanto, a oclusão coronariana aguda continua sendo uma causa prevalente de morte e incapacidade de origem cardíaca, persistindo, portanto, a busca de novos métodos, drogas ou estratégias que contribuam para uma maior preservação do tecido miocárdico nesse contexto. Pré-condicionamento cardíaco isquêmico, em suas diversas modalidades, que apesar de ter sido objeto de vários estudos, tanto clínicos como experimentais, não faz parte da prática usual no laboratório de cateterismo cardíaco, nos serviços de cardiologia crítica ou nas unidades móveis de emergência, onde a reperfusão miocárdica é realizada. Nesta controvérsia, os autores apresentam argumentos a favor e contra o uso do pré-condicionamento isquêmico remoto como adjuvante da angioplastia primária em um ambiente clínico específico, proporcionando ao leitor com o estado da evidência em um procedimento cuja margem de utilidade ainda aguarda uma definição clara.

Does methylene blue attenuate inflammation in nonischemic lungs after lung transplantation? / O azul de metileno atenua a inflamação em pulmões não isquêmicos após transplante pulmonar?

ABSTRACT Objective: To evaluate whether methylene blue (MB) could minimize the effects of ischemia-reperfusion injury in the nonischemic lung on a lung transplantation rodent model. Methods: Forty female Sprague-Dawley rats were divided into 20 donors and 20 recipients. The 20 recipient rats were divided into two groups (n = 10) according to the treatment (0.9% saline vs. 1% MB solutions). All animals underwent unilateral lung transplantation. Recipients received 2 mL of saline or MB intraperitoneally prior to transplantation. After 2 h of reperfusion, the animals were euthanized and histopathological and immunohistochemical analyses were performed in the nonischemic lung. Results: There was a significant decrease in inflammation-neutrophil count and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expression in lung parenchyma were higher in the saline group in comparison with the MB group-and in apoptosis-caspase-3 expression was higher in the saline group and Bcl-2 expression was higher in MB group. Conclusions: MB is an effective drug for the protection of nonischemic lungs against inflammation and apoptosis following unilateral lung transplantation in rats.

RESUMO Objetivo: Avaliar se o azul de metileno (AM) pode minimizar os efeitos da lesão de isquemia-reperfusão sobre o pulmão não isquêmico em um modelo de transplante pulmonar em roedores. Métodos: Quarenta ratas Sprague-Dawley foram divididas em 20 doadoras e 20 receptoras. As 20 ratas receptoras foram divididas em dois grupos (n = 10) de acordo com o tratamento (solução salina a 0,9% vs. AM a 1%). Todos os animais foram submetidos a transplante pulmonar unilateral. As receptoras receberam 2 ml de solução salina ou de AM por via intraperitoneal antes do transplante. Após 2 h de reperfusão, os animais foram sacrificados, e foram realizadas análises histopatológicas e imuno-histoquímicas no pulmão não isquêmico. Resultados: Houve diminuição significativa da inflamação - a contagem de neutrófilos e a expressão de intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1, molécula de adesão intercelular-1) foram maiores no grupo salina em comparação com o grupo AM - e da apoptose - a expressão de caspase-3 foi maior no grupo salina, e a expressão de Bcl-2 foi maior no grupo AM. Conclusões: O AM é uma droga eficaz para a proteção de pulmões não isquêmicos contra inflamação e apoptose após transplante pulmonar unilateral em ratos.

Resultados preliminares de hipotermia tópica do fígado em modelo de isquemia/reperfusão hepática em ratos / Preliminary results of topical hepatic hypothermia in a model of liver ischemia/reperfusion injury in rats

ABSTRACT BACKGROUND Ischemia/reperfusion causes organ damage but it is mandatory in hepatic transplantation, trauma and other complex liver surgeries, when Pringle maneuver is applied to minimize bleeding during these procedures. It is well known that liver ischemia/reperfusion leads to microcirculatory disturbance and cellular injury. In this setting hypothermia is known to reduce oxygen demand, lowering intracellular metabolism. OBJECTIVE: To evaluate the effects of hypothermia in liver ischemia/reperfusion injury, using a new model of topic isolated liver hypothermia. METHODS We used male Wistar rats weighting about 250 grams, kept in ad libitum feeding regime and randomly divided into two groups of nine animals: 1) Normothermic group, rats were submitted to normothermic ischemia of the median and left hepatic lobes, with subsequent resection of right and caudate lobes during liver reperfusion; and 2) Hypothermic group, rats were submitted to liver ischemia under hypothermia at 10°C. Liver ischemia was performed for 45 minutes. The animals were euthanized 48 hours after liver reperfusion for blood and liver tissue sampling. RESULTS The transaminases analyses showed a significant decrease of AST and ALT in Hypothermic group (P<0.01) compared to Normothermic group (1403±1234 x 454±213 and 730±680 x 271±211 U/L, respectively). Histology showed severe necrosis in 50% and mild necrosis in 50% of cases in Normothermic group, but severe necrosis in 10% and mild or absent necrosis 90% of the cases in hypothermic group. CONCLUSION: A simplified model of liver ischemia/reperfusion that simulates orthotopic liver autotransplantion was demonstrated. Topical hypothermia of isolated hepatic lobules showed liver protection, being a viable and practical method for any kind of in vivo liver preservation study.

RESUMO CONTEXTO: A isquemia/reperfusão leva a grave lesão de órgãos, mas ocorre obrigatoriamente no transplante hepático, no trauma e em outras cirurgias hepáticas complexas, quando a manobra de Pringle é aplicada com o intuito de minimizar o sangramento durante os procedimentos. É bem conhecido que a isquemia/reperfusão do fígado leva a distúrbios microcirculatórios e lesões celulares. Neste cenário, a hipotermia é conhecida por reduzir a demanda de oxigênio, diminuindo o metabolismo intracelular. OBJETIVO: Avaliar os efeitos da hipotermia na lesão de isquemia/reperfusão hepática utilizando-se um novo modelo de hipotermia isolada do fígado. MÉTODOS: Utilizaram-se ratos Wistar do sexo masculino com peso aproximado de 250 gramas, mantidos em regime de alimentação ad libitum e divididos aleatoriamente em dois grupos de nove animais: 1) Grupo Normotérmico - os ratos foram submetidos a isquemia normotérmica dos lobos hepáticos mediano e esquerdo, com posterior ressecção dos lobos direito e caudado durante a reperfusão hepática; e 2) Grupo Hipotérmico - os ratos foram submetidos a isquemia hepática sob hipotermia a 10°C. A isquemia hepática foi realizada durante 45 minutos. Os animais foram sacrificados 48 horas após a reperfusão hepática para coleta de sangue e tecido hepático para análise. RESULTADOS: As transaminases AST e ALT apresentaram diminuição significativa no grupo Hipotérmico (P<0,01) em relação ao grupo Normotérmico (1403±1234 x 454±213 e 730±680 x 271±211 U/L, respectivamente). A histologia mostrou necrose grave em 50% e necrose leve em 50% dos casos no grupo Normotérmico, porém, necrose grave em 10% e necrose leve ou ausente em 90% dos casos no grupo Hipotérmico. CONCLUSÃO: Foi demonstrado modelo simplificado de isquemia/reperfusão do fígado que simula o autotrasplante de fígado. A hipotermia tópica dos lóbulos hepáticos isolados mostrou proteção do fígado a ischemia/reperfusão, sendo um método viável e prático para qualquer tipo de estudo de preservação hepática in vivo.

Kidney ischemia and reperfunsion syndrome: effect of lidocaine and local postconditioning / Síndrome de isquemia e reperfussão renal: efeito da lidocaína e do pós-condicionamento local

ABSTRACT Objective: to evaluate the effects of blocking the regulation of vascular tone on the ischemia and reperfusion syndrome in rats through the use of lidocaine in the postconditioning technique. Methods: we randomized 35 rats into seven groups of five animals: Group 1- Control; Group 2- Ischemia and Reperfusion; Group 3- Ischemia, Reperfusion and Saline; Group 4- Ischemic Postconditioning; Group 5- Ischemic Postconditioning and Saline; Group 6- Lidocaine; Group 7- Ischemic Postconditioning and Lidocaine. Except for the control group, all the others were submitted to renal ischemia for 30 minutes. In postconditioning groups, we performed ischemia and reperfusion cycles of five minutes each, applied right after the main ischemia. In saline and lidocaine groups, we instilled the substances at a rate of two drops per minute. To compare the groups, we measured serum levels of urea and creatinine and also held renal histopathology. Results: The postconditioning and postconditioning + lidocaine groups showed a decrease in urea and creatinine values. The lidocaine group showed only a reduction in creatinine values. In histopathology, only the groups submitted to ischemic postconditioning had decreased degree of tubular necrosis. Conclusion: Lidocaine did not block the effects of postconditioning on renal ischemia reperfusion syndrome, and conferred better glomerular protection when applied in conjunction with ischemic postconditioning.

RESUMO Objetivo: avaliar os efeitos do bloqueio da regulação do tônus vascular por meio do uso da lidocaína na técnica de pós-condicionamento isquêmico na síndrome de isquemia e reperfusão renal em ratos. Métodos: trinta e cinco ratos foram randomizados em sete grupos de cinco animais: Grupo 1- Controle; Grupo 2- Isquemia e Reperfusão; Grupo 3- Isquemia, Reperfusão e Solução Salina; Grupo 4- Pós-condicionamento Isquêmico; Grupo 5- Pós-condicionamento Isquêmico e Solução Salina; Grupo 6- Lidocaína; Grupo 7- Pós-condicionamento Isquêmico e lidocaína. Com exceção do grupo controle, todos os demais foram submetidos à isquemia renal de 30 minutos. Nos grupos de pós-condicionamento, foi realizado o ciclo de isquemia e reperfusão de cinco minutos cada, aplicado logo após a isquemia principal. Nos grupos salina e lidocaína foram instiladas as substâncias numa taxa de duas gotas por minuto. Para comparar os grupos, foram dosados os níveis séricos de ureia e creatinina e análise histopatológica renal. Resultados: os grupos pós-condicionamento e pós-condicionamento + lidocaína apresentaram uma redução nos valores de ureia e creatinina. O grupo lidocaína apresentou apenas uma redução nos valores de creatinina. Na análise histopatológica, apenas os grupos submetidos ao pós-condicionamento isquêmico apresentaram redução do grau de necrose tubular. Conclusão: a lidocaína não bloqueou os efeitos do pós-condicionamento na síndrome de isquemia e reperfusão renal, mas conferiu melhor na proteção glomerular quando aplicada em conjunto com o pós-condicionamento isquêmico.

Effects of N-acetylcysteine and pentoxifylline on remote lung injury in a rat model of hind-limb ischemia/reperfusion injury / Efeitos da N-acetilcisteína e pentoxifilina na lesão pulmonar remota em um modelo de lesão de isquemia/reperfusão de membro posterior em ratos

Objective : To investigate the effects of N-acetylcysteine (NAC) and pentoxifylline in a model of remote organ injury after hind-limb ischemia/reperfusion (I/R) in rats, the lungs being the remote organ system. Methods : Thirty-five male Wistar rats were assigned to one of five conditions (n = 7/group), as follows: sham operation (control group); hind-limb ischemia, induced by clamping the left femoral artery, for 2 h, followed by 24 h of reperfusion (I/R group); and hind-limb ischemia, as above, followed by intraperitoneal injection (prior to reperfusion) of 150 mg/kg of NAC (I/R+NAC group), 40 mg/kg of pentoxifylline (I/R+PTX group), or both (I/R+NAC+PTX group). At the end of the trial, lung tissues were removed for histological analysis and assessment of oxidative stress. Results : In comparison with the rats in the other groups, those in the I/R group showed lower superoxide dismutase activity and glutathione levels, together with higher malondialdehyde levels and lung injury scores (p < 0.05 for all). Interstitial inflammatory cell infiltration of the lungs was also markedly greater in the I/R group than in the other groups. In addition, I/R group rats showed various signs of interstitial edema and hemorrhage. In the I/R+NAC, I/R+PTX, and I/R+NAC+PTX groups, superoxide dismutase activity, glutathione levels, malondialdehyde levels, and lung injury scores were preserved (p < 0.05 for all). The differences between the administration of NAC or pentoxifylline alone and the administration of the two together were not significant for any of those parameters (p > 0.05 for all). Conclusions : Our results suggest that NAC and pentoxifylline both protect lung tissue from the effects of skeletal muscle I/R. However, their combined use does not appear to increase the level of that protection.

Objetivo : Investigar os efeitos da N-acetilcisteína (NAC) e pentoxifilina em um modelo de lesão pulmonar remota após isquemia/reperfusão (I/R) de membro posterior em ratos. Métodos : Trinta e cinco ratos Wistar machos foram divididos em cinco grupos (n = 7/grupo), cada qual submetido ao seguinte: operação simulada (grupo controle); isquemia de membro posterior, induzida por pinçamento da artéria femoral esquerda por 2 h, seguida por de 24 h de reperfusão (grupo I/R); e isquemia de membro posterior, como descrito acima, seguida de injeção intraperitoneal (antes da reperfusão) de 150 mg/kg de NAC (grupo I/R+NAC), 40 mg/kg de pentoxifilina (grupo I/R+PTX) ou ambas (grupo I/R+NAC+PTX). Ao final do experimento, tecidos pulmonares foram removidos para análise histológica e avaliação do estresse oxidativo. Resultados : Comparados aos ratos dos outros grupos, os do grupo I/R apresentaram menor atividade de superóxido dismutase e menores níveis de glutationa, além de maiores níveis de malondialdeído e maiores escores de lesão pulmonar (p < 0,05 para todos). Infiltração celular inflamatória intersticial dos pulmões também foi bem maior no grupo I/R do que nos outros grupos. Além disso, os ratos do grupo I/R apresentaram vários sinais de edema intersticial e hemorragia. Nos grupos I/R+NAC, I/R+PTX e I/R+NAC+PTX, a atividade de superóxido dismutase, níveis de glutationa, níveis de malondialdeído e escores de lesão pulmonar foram preservados (p < 0,05 para todos). As diferenças entre a administração de NAC ou pentoxifilina isoladamente e a das duas combinadas não foi significativa para nenhum desses parâmetros (p > 0,05 para todos). Conclusões : Nossos resultados sugerem que tanto NAC quanto pentoxifilina protegem o tecido pulmonar dos efeitos de I/R de músculo esquelético. Entretanto, seu uso combinado não parece aumentar o nível dessa proteção.

The Effect of Sleep Deprivation on Cardiac Function and Tolerance to Ischemia-Reperfusion Injury in Male Rats / O Efeito da Privação de Sono na Função Cardíaca e Tolerância à Lesão de Isquemia-Reperfusão em Ratos

Abstract Background: Sleep deprivation (SD) is strongly associated with elevated risk for cardiovascular disease. Objective: To determine the effect of SD on basal hemodynamic functions and tolerance to myocardial ischemia-reperfusion (IR) injury in male rats. Method: SD was induced by using the flowerpot method for 4 days. Isolated hearts were perfused with Langendorff setup, and the following parameters were measured at baseline and after IR: left ventricular developed pressure (LVDP); heart rate (HR); and the maximum rate of increase and decrease of left ventricular pressure (±dp/dt). Heart NOx level, infarct size and coronary flow CK-MB and LDH were measured after IR. Systolic blood pressure (SBP) was measured at start and end of study. Results: In the SD group, the baseline levels of LVDP (19%), +dp/dt (18%), and -dp/dt (21%) were significantly (p < 0.05) lower, and HR (32%) was significantly higher compared to the controls. After ischemia, hearts from SD group displayed a significant increase in HR together with a low hemodynamic function recovery compared to the controls. In the SD group, NOx level in heart, coronary flow CK-MB and LDH and infarct size significantly increased after IR; also SD rats had higher SBP after 4 days. Conclusion: Hearts from SD rats had lower basal cardiac function and less tolerance to IR injury, which may be linked to an increase in NO production following IR.

Resumo Fundamento: A privação de sono (PS) acha-se fortemente associada a alto risco cardiovascular. Objetivo: Determinar o efeito da PS nas funções hemodinâmicas basais e tolerância à lesão miocárdica de isquemia‑reperfusão (IR) em ratos machos. Métodos: A PS foi induzida com o método da plataforma única por 4 dias. Utilizou-se o modelo de perfusão de coração isolado de Langendorff, medindo-se os seguintes parâmetros nas condições basais e após IR: pressão desenvolvida no ventrículo esquerdo (PDVE), frequência cardíaca (FC) e taxa máxima de aumento e redução da pressão do ventrículo esquerdo (±dp/dt). O nível cardíaco de NOx, o tamanho do infarto e os níveis de CK-MB e LDH no efluente coronário foram medidos após IR. A pressão arterial sistólica (PAS) foi medida no início e no final do estudo. Resultados: No grupo PS, os valores basais de PDVE (19%), +dp/dt (18%) e-dp/dt (21%) foram significativamente mais baixos (p < 0,05), e a FC (32%) significativamente mais alta em comparação aos dos controles. Após isquemia, os corações do grupo PS apresentavam um significativo aumento da FC além de uma menor recuperação da função hemodinâmica em comparação aos dos controles. No grupo PS, os níveis de NOx no coração e de CK-MB e LDH no efluente coronário, além do tamanho do infarto, foram significativamente maiores após IR. O grupo PS também apresentou maior PAS após 4 dias. Conclusão: Os corações do grupo PS apresentaram menor função cardíaca basal e menor tolerância à lesão de IR, o que pode estar relacionado ao aumento da produção de NO após IR.

Avaliação do papel do sistema canabidiol em um modelo de lesão renal por isquemia/reperfusão em animais / Evaluation of the role of the cannabidiol system in an animal model of ischemia/reperfusion kidney injury

RESUMO Objetivo: Investigar os efeitos da administração de canabidiol em um modelo de isquemia/reperfusão renal em animais. Métodos: Foi induzida uma lesão renal, por meio de 45 minutos de isquemia renal seguida por reperfusão. Administrou-se canabidiol (5mg/kg) imediatamente após a reperfusão. Resultados: A isquemia/reperfusão aumentou os níveis de interleucina 1 e fator de necrose tumoral, o que foi atenuado pelo tratamento com canabidiol. Além disso, o canabidiol foi capaz de diminuir o dano oxidativo de lipídios e proteínas, mas não os níveis de nitrito/nitrato. A lesão renal após isquemia/reperfusão pareceu ser independente da expressão dos receptores canabidiol-1 e canabidiol-2, já que não houve aumento significante desses receptores após a reperfusão. Conclusão: O tratamento com canabidiol teve um efeito protetor contra a inflamação e o dano oxidativo em um modelo de isquemia/reperfusão renal. Esses efeitos parecem não ocorrer via ativação dos receptores canabidiol-1/canabidiol-2.

ABSTRACT Objective: This work aimed to investigate the effects of the administration of cannabidiol in a kidney ischemia/reperfusion animal model. Methods: Kidney injury was induced by 45 minutes of renal ischemia followed by reperfusion. Cannabidiol (5mg/kg) was administered immediately after reperfusion. Results: Ischemia/reperfusion increased the IL-1 and TNF levels, and these levels were attenuated by cannabidiol treatment. Additionally, cannabidiol was able to decrease lipid and protein oxidative damage, but not the nitrite/nitrate levels. Kidney injury after ischemia/reperfusion seemed to be independent of the cannabidiol receptor 1 and cannabidiol receptor 2 (CB1 and CB2) expression levels, as there was no significant increase in these receptors after reperfusion. Conclusion: The cannabidiol treatment had a protective effect against inflammation and oxidative damage in the kidney ischemia/reperfusion model. These effects seemed to be independent of CB1/CB2 receptor activation.

Mecanismo molecular da isquemia/reperfusão e pré-condicionamento isquêmico / Molecular mechanisms of ischemia/reperfusion and ischemic preconditioning

O processo de isquemia/reperfusão (I/R) desencadeia mecanismos moleculares que levam a alterações nas estruturas celulares que podem ser atenuadas por manobras cirúrgicas ou pelo uso de drogas. Durante o período de isquemia, estruturas celulares são progressivamente lesadas, no entanto, a restauração do fluxo sanguíneo, paradoxalmente, pode agravar ainda mais o dano celular isquêmico. Os mecanismos moleculares pelo qual ocorrem essas lesões na isquemia/reperfusão ainda não são totalmente compreendidos e muitos estudos têm sido realizados na tentativa de minimizar os efeitos deletérios. Alterações oriundas da falta de oxigênio, devido a alterações no metabolismo celular, liberação de citocinas, interação entre leucócitos e células endoteliais e a produção de radicais livres, assim como óxido nítrico são discutidas. Em algumas investigações clínicas, a preponderância de evidências até agora sugerem que a administração de agentes doadores de óxido nítrico, drogas ou manobras cirúrgicas podem ser tratamentos eficazes para a lesão I/R em seres humanos.

Mechanisms Involved in Exercise-Induced Cardioprotection: A Systematic Review / Mecanismos Envolvidos na Cardioproteção Induzida pelo Exercício Físico: Uma Revisão Sistemática

Acute myocardial infarction is the leading cause of morbidity and mortality worldwide. Furthermore, research has shown that exercise, in addition to reducing cardiovascular risk factors, can also protect the heart against injury due to ischemia and reperfusion through a direct effect on the myocardium. However, the specific mechanism involved in exerciseinduced cardiac preconditioning is still under debate.

O infarto agudo do miocárdio é a principal causa de mortalidade e de morbidade na população mundial. Por outro lado, pesquisas já demonstraram que o exercício físico, além de reduzir os fatores de risco cardiovascular, também é capaz de promover cardioproteção contra lesões por isquemia e reperfusão, por meio de um efeito direto no miocárdio. No entanto, o mecanismo específico envolvido no pré-condicionamento cardíaco induzido pelo exercício ainda é alvo de discussão.

Carbon dioxide as a substitute for iodine contrast in arteriography during embolectomy / Uso de dióxido de carbono como substituto ao contraste iodado em arteriografia durante embolectomia

Acute limb ischemia can be potentially harmful to the limb and life threatening. Renal failure is a possible outcome associated with release of products of ischemic limb reperfusion. Some authors reported the benefit of performing angiography after embolectomy, even though iodine contrast is also nephrotoxic. We report a case of embolectomy on a patient with renal insufficiency in whom carbon dioxide was used as a substitute for iodine contrast.

A isquemia aguda de membro pode ser danosa para o membro e para a vida. A insuficiência renal é um desfecho possível associado à liberação dos produtos da reperfusão do membro isquêmico. Alguns autores relatam o benefício de realização de angiografia após embolectomia, apesar do contraste iodado também ser nefrotóxico. Relatamos um caso de embolectomia em uma paciente com insuficiência renal, em que o dióxido de carbono foi utilizado como substituto para o contraste iodado.

Quercetin protects the retina by reducing apoptosis due to ischemia-reperfusion injury in a rat model / Quercetina protege a retina reduzindo a apoptose consequente à lesão por isquemia e reperfusão em um modelo de rato

Purpose: This study aimed to investigate the effect of quercetin on apoptotic cell death induced by ischemia-reperfusion (I/R) injury in the rat retina. Methods: Twenty-four rats were divided into four equal groups: control, ischemic, solvent, and quercetin. I/R injury was achieved by elevating the intraocular pressure above the perfusion pressure. Intraperitoneal injections of 20 mg/kg of quercetin and dimethyl sulfoxide (DMSO) were performed in the quercetin and solvent groups, respectively, immediately prior to I/R injury, and the researchers allowed for the retinas to be reperfused. Forty-eight hours after injury, the thicknesses of the retinal ganglion cell layer (RGCL), inner nuclear layer (INL), inner plexiform layer (IPL), outer plexiform layer (OPL), and outer nuclear layer (ONL) were measured in all groups. Moreover, the numbers of terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end-labeled [TUNEL (+)] cells and caspase-3 (+) cells in both INL and ONL were evaluated in all groups. Results: The administration of quercetin was found to reduce the thinning of all retinal layers. The mean thickness of INL in the quercetin and ischemic groups was 21 ± 5.6 µm and 16 ± 6.4 µm, respectively (P<0.05). Similarly, the mean thickness of ONL in the quercetin and ischemic groups was 50 ± 12.8 µm and 40 ± 8.7 µm, respectively (P<0.05). The antiapoptotic effect of quercetin in terms of reducing the numbers of both TUNEL (+) cells and caspase-3 (+) cells was significant in INL. The mean number of TUNEL (+) cells in INL in the ischemic and quercetin groups was 476.8 ± 45.6/mm2 and 238.72 ± 251/mm2, respectively (P<0.005). The mean number of caspase-3 (+) cells in INL of ischemic and quercetin groups was 633.6 ± 38.7/mm2 and 342.4 ± 36.1/mm2, respectively (P<0.001). Conclusion: The use of quercetin may be beneficial in the treatment of retinal I/R injury because of its antiapoptotic effect on the retinal layers, particularly in INL. .

Objetivo: O objetivo deste estudo é investigar o efeito da quercetina, contra a morte celular por apoptose induzida por lesão consequente à isquemia-reperfusão (I/R) na retina de ratos. Método: Vinte e quatro ratos foram divididos em quatro grupos iguais: controle, isquêmico, solvente e quercetina. O modelo lesão por I/R foi realizado por meio da elevação da pressão intraocular acima da pressão de perfusão, em todos os grupos. Injecções intraperitoneais de 20 mg/kg de quercetina ou sulfóxido de dimetilo (DMSO) foram realizadas nos grupos quercetina e solvente, respectivamente, imediatamente antes da lesão por I/R, permitindo que as retinas fossem reperfundidas. Quarenta e oito horas após a lesão, as espessuras de camada de células ganglionares da retina (RGCL), camada nuclear interna (INL), camada plexiforme interna (IPL), camada plexiforme externa (OPL), e a camada nuclear externa (ONL) foram medidas em todos os grupos. Além disso, o número de células TUNEL (+) e caspase-3 (+) tanto na camada nuclear interna quanto na camada nuclear externa foi avaliada em todos os grupos. Resultados: A administração de quercetina diminuiu o afinamento de todas as camadas da retina em comparação com o grupo isquêmico. A espessura média da camada nuclear interna nos grupos quercetina e isquêmico foi de 21 ± 5,6 µm e 16 ± 6,4 µm, respectivamente (p<0,05). A espessura média da camada nuclear externa no grupo quercetina e isquêmico foi 50 ± 12,8 µm e 40 ± 8,7 µm, respectivamente (p<0,05). O efeito anti-apoptótico de quercetina em termos de redução do número de células TUNEL (+) e caspase-3 (+) foi significativa na INL. O número médio de células TUNEL (+) da camada nuclear interna no grupo isquêmico e quercetina foi 476,8 ± 45,6/mm2 e 238,72 ± 251/mm2, respectivamente (p<0,005). O médio número de células de caspase-3 (+) na INL do grupo isquêmico e quercetina foi 633,6 ± 38,7/mm2 e 342,4 ± 36,1/mm2, respectivamente (p<0,001). Conclusão: A utilização ...

Ischemia and reperfusion injury in renal transplantation: hemodynamic and immunological paradigms / Lesão de isquemia e reperfusão no transplante renal: paradigmas hemodinâmico e imunológico

Ischemia and reperfusion injury is an inevitable event in renal transplantation. The most important consequences are delayed graft function, longer length of stay, higher hospital costs, high risk of acute rejection, and negative impact of long-term follow-up. Currently, many factors are involved in their pathophysiology and could be classified into two different paradigms for education purposes: hemodynamic and immune. The hemodynamic paradigm is described as the reduction of oxygen delivery due to blood flow interruption, involving many hormone systems, and oxygen-free radicals produced after reperfusion. The immune paradigm has been recently described and involves immune system cells, especially T cells, with a central role in this injury. According to these concepts, new strategies to prevent ischemia and reperfusion injury have been studied, particularly the more physiological forms of storing the kidney, such as the pump machine and the use of antilymphocyte antibody therapy before reperfusion. Pump machine perfusion reduces delayed graft function prevalence and length of stay at hospital, and increases long-term graft survival. The use of antilymphocyte antibody therapy before reperfusion, such as Thymoglobulin™, can reduce the prevalence of delayed graft function and chronic graft dysfunction.

A lesão de isquemia e reperfusão é um evento inevitável no transplante de rim, tendo como consequências retardo na função do enxerto, aumento no tempo de hospitalização e dos custos, aumento no risco de rejeição aguda e potencial impacto negativo na evolução a longo prazo. Atualmente, vários fatores estão implicados na fisiopatologia da lesão de isquemia e reperfusão, podendo ser didaticamente divididos em dois paradigmas: hemodinâmico e imunológico. O paradigma hemodinâmico é classicamente descrito como a privação de oxigênio pela interrupção do fluxo sanguíneo, envolvendo diversos sistemas hormonais e pela produção de radicais livres de oxigênio após a reperfusão. O paradigma imunológico tem sido descrito mais recentemente e envolve as células do sistema imune, sobretudo as células T, como papel fundamental na lesão. De acordo com esses conceitos, novas estratégias de prevenção dos impactos da lesão de isquemia e reperfusão têm sido estudadas, especialmente formas mais fisiológicas de preservação do órgão, como a preservação em máquina de perfusão e o uso de anticorpos depletores de linfócitos antes da reperfusão. A perfusão em máquina reduz a prevalência de retardo na função do enxerto e o tempo de hospitalização, além de melhorar a sobrevida do enxerto a longo prazo. Já o uso de anticorpos depletores de linfócitos, como Timoglobulina®, antes da reperfusão, pode diminuir a prevalência de retardo na função do enxerto e a disfunção crônica do mesmo.

Efeitos da administração endovenosa de pentoxifilina na isquemia-reperfusão pancreática: estudo experimental em ratos

INTRODUÇÃO: O pâncreas é um órgão suscetível a lesões de isquemia-reperfusão (I/R). Estratégias terapêuticas para reduzir os danos produzidos pela I/R podem melhorar os resultados nos transplantes de pâncreas-rim. Apesar dos efeitos hemorreológicos da pentoxifilina, esta droga tem ação anti-inflamatória através da inibição da ativação de NF-kB e da produção de TNF-alfa. Foi demonstrado previamente que a pentoxifilina diminui a resposta inflamatória em modelos experimentais de pancreatite aguda e I/R hepática. Assim, a pentoxifilina pode contribuir na redução da lesão pancreática e da reposta inflamatória sistêmica em um modelo de I/R pancreática. Objetivo: Avaliar o efeito da administração de pentoxifilina em um modelo experimental de I/R pancreática em ratos. MÉTODOS: A I/R pancreática foi realizada em sessenta ratos Wistar, por um período de uma hora através da oclusão da artéria esplênica. Os animais deste experimento foram divididos em três grupos: Grupo 1 (sham; realizado procedimento cirúrgico sem indução da I/R), grupo 2 (controle; realizado indução da I/R) que recebeu solução salina por via endovenosa e grupo 3 (pentoxifilina; realizado indução da I/R associado ao tratamento) que recebeu pentoxifilina (25mg/kg) por via endovenosa. Foram colhidas amostras de sangue para dosagem de amilase, creatinina, ureia, fator de necrose tumoral ? (TNF-alfa), interleucina-6 (IL-6) e interleucina-10 (IL-10). Os níveis de malondialdeído (MDA) pancreático, da mieloperoxidase (MPO) pulmonar e a histologia pancreática também foram avaliados. RESULTADOS: A inibição do TNF-alfa pela pentoxifilina apresentou efeitos benéficos neste modelo experimental. O grupo de animais tratados com pentoxifilina apresentou níveis séricos significantemente menores de TNF-alfa, IL-6 e IL-10 em comparação ao grupo controle (p < 0,05)...

INTRODUCTION: The pancreas is an organ extremely susceptible to periods of ischemia. Therapeutic strategies to reduce the occurrence of pancreatic ischemiareperfusion (I/R) injury might improve outcomes in human pancreas and kidney transplantation. In addition to its haemorrheologic effects, pentoxifylline has an antiinflammatory effect by inhibiting NF-?B activation and TNF-alfa production. It has been previously demonstrated that pentoxifylline induces an anti-inflammatory response in acute pancreatitis and liver I/R models. This led to the hypothesis that pentoxifylline might reduce pancreatic lesion and the systemic inflammatory response in pancreatic I/R injury. Objective: The aim of this experimental study was to evaluate the effect of pentoxifylline administration in a rat model of pancreatic I/R injury. METHODS: Pancreatic I/R was performed in sixty Wistar rats over one hour by clamping the splenic vessels. The animals of this study were divided into three groups: group 1 (sham, surgical procedure without pancreatic I/R induction), group 2 (control, I/R induction) received saline solution administered intravenously, and group 3 (pentoxifylline, I/R induction plus treatment) rats received pentoxifylline (25 mg/kg) administered intravenously. Blood samples were collected to enable the determination of amylase, creatinine, urea, tumour necrosis factor-? (TNF-alfa), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-10 (IL-10). Pancreatic malondialdehyde (MDA) content, pulmonary myeloperoxidase (MPO) and pancreas histology were also assessed. RESULTS: Inhibition of TNF-alfa by pentoxifylline shows beneficial effects in this experimental model. Significant reductions in serum TNF-?, IL-6 and IL-10 were observed in pentoxifylline group compared with control group (p < 0.05)...

Unfeasible experimental model of normothermic hepatic ischemia and reperfusion in rats using the Pringle maneuver / Modelo experimental inviável de isquemia e reperfusão hepática normotérmica em ratos utilizando a manobra de Pringle

BACKGROUND: The negative result of a research does not always indicate failure, and when the data do not permit a proper conclusion, or are contrary to the initial project, should not simply be discarded and archived. AIM: To report failure after performing experimental model of liver ischemia and reperfusion normothermic, continuous or intermittent, in small animals aiming at the study of biochemical and histological parameters after postoperative recovery. METHODS: Fifteen Wistar rats were divided into three groups of five animals each; all underwent surgery, the abdomen was sutured after the proposed procedures for each group and the animals were observed for 6 h or until they died, and then were reoperated. In Group 1, control (sham-operated): dissection of the hepatic hilum was performed; in Group 2: clamping of the hepatic hilum for 30 m; in Group 3: clamping of the hepatic hilum for 15 m, reperfusion for 5 m and another 15 m of clamping. Data from Groups 2 and 3 were compared with Student's t test. RESULTS: All animals of Group 1 survived for 6 h. Two animals in Group 2 died before the 6 h needed to validate the experiment; two did not recover from anesthesia and one survived until the end. In Group 3, four animals died before the 6 h established and one of them survived the required time. Only one animal in Group 2 and one in Group 3 survived and were able to accomplish the study. There was no statistical significance when the results of Groups 2 and 3 were compared (p>0.05). CONCLUSION: The death of six animals before the necessary period of observation turned the initial proposal of the experiment unfeasible. .

RACIONAL: O resultado negativo de uma pesquisa nem sempre indica falha, e quando os dados obtidos não permitem uma conclusão adequada, ou ainda, são contrários ao projeto inicial, não devem simplesmente ser desprezados e arquivados. OBJETIVO: Relatar falha ao realizar em animais de pequeno porte modelo experimental de isquemia e reperfusão hepática normotérmica, contínua ou intermitente, visando estudar parâmetros bioquímicos e histológicos após a recuperação pós-operatória. MÉTODOS: Quinze ratos da linhagem Wistar foram divididos em três grupos com cinco animais cada; todos foram operados, a cavidade abdominal foi suturada após os procedimentos propostos para cada grupo e os ratos foram observados por 6 h ou até morrerem, quando foram reoperados. Foram realizados no Grupo 1, controle (sham-operated): dissecção do hilo hepático; no Grupo 2: pinçamento do hilo hepático por 30 m; no Grupo 3: pinçamento do hilo hepático por 15 m, reperfusão do fígado por 5 m e mais 15 m de pinçamento. Os dados dos grupos 2 e 3 foram comparados com o teste t de Student. RESULTADOS: Todos os animais do Grupo 1 sobreviveram 6 h. Dois do Grupo 2 morreram antes das 6 h necessárias para a validação do experimento, dois não se recuperaram da primeira anestesia e um sobreviveu até o final. No Grupo 3, quatro animais morreram antes das 6 h previstas e um sobreviveu o tempo necessário. Apenas um animal do Grupo 2 e um do Grupo 3 sobreviveu ou se encontrava em condições para a complementação do estudo. Não houve significância estatística quando os resultados dos Grupos 2 e 3 foram comparados (p>0,05). CONCLUSÃO: A morte de seis animais antes do período de observação necessário após a primeira operação ...

O impacto das soluções hipertônica e salina fisiológica na reperfusão do trato gastrintestinal pós-isquemia em ratos / The impact of hypertonic and normal saline in gut reperfusion after ischemia in rats

Objetivo: Investigar o papel de duas diferentes soluções salinas nos mecanismos de lesão após isquemia intestinal: estresse oxidativo e respostas inflamatórias. Métodos: Ratos Wistar foram submetidos a oclusão transitória da artéria mesentérica superior e estudados durante as 6 horas seguintes à reperfusão. Após randomização, os animais foram divididos em quatro grupos: Falso; Solução Hipertônica, os quais receberam infusão de solução salina hipertônica a 7,5% (4mL/kg de peso corpóreo); Solução Fisiológica, os quais receberam infusão de solução salina a 0,9% (33mL/kg); e Sem Tratamento. A infusão foi realizada imediatamente antes da reperfusão. Foram realizadas dosagens sequenciais de interleucina 6 e interleucina 10 no plasma. Foram coletadas amostras de tecidos (pulmão, fígado e intestino) para medir malondialdeído, mieloperoxidase e interleucina. Resultados: Em comparação ao Grupo Sem Tratamento, os animais que receberam volume (Grupos Solução Hipertônica e Solução Fisiológica) mostraram níveis tissulares mais baixos de malondialdeído, mieloperoxidase, interleucina 6 e interleucina 10. As concentrações plasmáticas de interleucina 6 e interleucina 10 foram mais altas nos animais tratados com solução hipertônica do que nos tratados com solução fisiológica e nos sem tratamento. Conclusão: Neste modelo de isquemia intestinal transitória, a manutenção adequada de volume intravascular diminuiu o estresse oxidativo e a síntese de marcadores de inflamação. Tanto a solução hipertônica quanto a fisiológica atenuaram os efeitos deletérios observados após isquemia intestinal. .

Objective: We investigated the effect of two different saline solutions on the mechanisms of injury after intestinal ischemia: oxidative stress and inflammatory responses. Methods: Wistar rats underwent transient superior mesenteric artery occlusion and were studied for 6 hours after reperfusion. After randomization, the animals were divided into four groups: Sham; Hypertonic Saline, in which they received infusion of 4mL/kg body weight of 7.5% hypertonic saline; Saline, in which they received infusion of 33mL/kg body weight of 0.9% saline; and Non Treatment. The infusion was performed immediately prior to the reperfusion. The plasma concentrations of interleukin 6 and interleukin 10 were measured. Tissue samples (lung, liver, and intestine) were collected for malondialdehyde, myeloperoxidase, and interleukin measurements. Results: The animals that received infusions (Hypertonic Saline and Saline) showed lower levels of tissue malondialdehyde, myeloperoxidase, interleukin 6, and interleukin 10 compared with the Non Treatment group. The plasma concentrations of interleukin 6 and interleukin 10 were higher in the animals treated with 7.5% hypertonic saline compared with Saline and Non Treatment groups. Conclusion: In this model of transient intestinal ischemia, the adequate maintenance of intravascular volume decreased oxidative stress and the synthesis of inflammatory markers. Both 7.5% Hypertonic Saline and Saline attenuated the deleterious effects observed after intestinal ischemia. .

Cold ischemia or topical-ECMO for lung preservation: a randomized experimental study / Preservacao pulmonar por isquemia fria ou ECMO-topico: um estudo aleatorio experimental

CONTEXT AND OBJECTIVE: Lung preservation remains a challenging issue for lung transplantation groups. Along with the development of ex vivo lung perfusion, a new preservation method known as topical-ECMO (extracorporal membrane oxygenation) has been proposed. The present study compared topical-ECMO with cold ischemia (CI) for lung preservation in an ex vivo experimental model. DESIGN AND SETTING: Randomized experimental study, conducted at a public medical school. METHOD: Fourteen human lungs were retrieved from seven brain-dead donors that were considered unsuitable for transplantation. The lung bloc was divided and each lung was randomized to be preserved by means of topical-ECMO or CI (4-7 °C) for eight hours. These lungs were then reconnected to an ex vivo perfusion system for functional evaluation. Lung biopsies were obtained at three times. The functional variables assessed were oxygenation capacity (OC) and pulmonary artery pressure (PAP); and the histological variables were lung injury score (LIS) and apoptotic cell count (ACC). RESULTS : The mean OC was 468 mmHg (± 81.6) in the topical-ECMO group and 455.8 (± 54) for CI (P = 0.758). The median PAP was 140 mmHg (120-160) in the topical-ECMO group and 140 mmHg (140-150) for CI (P = 0.285). The mean LIS was 35.57 (± 4.5) in the topical-ECMO group and 33.86 (± 6.1) for CI (P = 0.367). The ACC was 25.00 (± 9.34) in the topical-ECMO group and 24.86 (± 10.374) for CI (P = 0.803). CONCLUSIONS: The present study showed that topical-ECMO was not superior to cold ischemia for up to eight hours of lung preservation. .

CONTEXTO E OBJETIVO: A preservação pulmonar permanece um desafio para os grupos transplantadores. Com o desenvolvimento da perfusão pulmonar ex vivo, foi proposto um novo método de preservação chamado de ECMO-tópico (oxigenação de membrana extracorpórea). O presente estudo compara ECMO-tópico com isquemia fria (IF) para preservação pulmonar em um modelo experimental ex vivo. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo experimental randomizado, conduzido em uma faculdade de medicina pública. MÉTODO: Quatorze pulmões humanos foram retirados de sete doadores de morte cerebral considerados não aptos a transplante. O bloco pulmonar foi dividido e cada um foi aleatorizado para preservação por ECMO-tópico ou IF (4-7 °C) durante oito horas. Esses pulmões foram então re-conectados a um sistema de perfusão ex vivo para avaliação funcional. Biópsias pulmonares foram obtidas em três tempos. As variáveis funcionais avaliadas foram: capacidade de oxigenação (CO) e pressão de artéria pulmonar (PAP). As variáveis histológicas estudadas foram escore de lesão pulmonar (ELP) e contagem de células apoptóticas (CCA). RESULTADOS: A média da CO foi de 468 mmHg (± 81.6) no grupo ECMO-tópico e 455.8 (± 54) no grupo IF (P = 0,758); a PAP média foi de 140 mmHg (120-160) para ECMO-tópico e 140 mmHg (140-150) para IF (P = 0,285); o ELP médio foi 35,57 (± 4,5) no ECMO-tópico e 33,86 (± 6,1) no IF (P = 0,367). A CCA foi 25,00 (± 9,34) no grupo ECMO-tópico e 24,86 (± 10,374) no IF (P = 0,803). CONCLUSÕES: O presente estudo demonstrou que o ECMO-tópico não é superior a IF para oito horas de preservação pulmonar. .